Elektroforezė kas tai yra, kam jis skirtas ir kaip jis pagamintas

Elektroforezė yra laboratorinė technika, atliekama siekiant atskirti molekules pagal jų dydį ir elektros krūvį, kad būtų galima diagnozuoti ligas, patikrinti baltymų ekspresiją arba nustatyti mikroorganizmus..

Elektroforezė yra paprasta ir nebrangi procedūra, naudojama atliekant laboratorines procedūras ir atliekant tyrimų projektus. Pagal elektroforezės tikslą gali reikėti atlikti kitus tyrimus ir egzaminus diagnozei nustatyti, pvz..

Kam jis skirtas?

Elektroforezė gali būti atliekama skirtingais tikslais tiek mokslinių tyrimų projektuose, tiek diagnozuojant, nes tai yra paprasta ir nebrangi technika. Taigi elektroforezę galima atlikti:

• Identifikuokite virusus, grybelius, bakterijas ir parazitus; ši programa yra labiau paplitusi mokslinių tyrimų projektuose;
• Tėvystės testas;
• Patikrinkite baltymų ekspresiją;
• Nustatyti mutacijas, kurios yra naudingos, pavyzdžiui, diagnozuojant leukemiją;
• Išanalizuoti cirkuliuojančio hemoglobino tipus, naudingus diagnozuojant pjautuvo pavidalo ląstelių anemiją;
• Įvertinkite baltymų kiekį kraujyje.

Pagal elektroforezės tikslą gydytojui gali prireikti atlikti kitus papildomus tyrimus, kad diagnozė būtų baigta..

Kaip tai daroma

Elektroforezei atlikti reikia gelio, kuris gali būti iš poliakrilamido arba agarozės, priklausomai nuo objektyvo, elektroforezės buferio ir muilo, molekulinio svorio žymeklio ir fluorescencinio dažo, be UV ar LED šviesos įrangos, dar žinomos kaip transiluminatorius..

Paruošus gelį, reikia įdėti tam tikrą daiktą, kad šuliniai būtų sudaryti į gelį, liaudiškai vadinamą šukomis, ir leisti geliui nusistatyti. Kai gelis paruoštas, medžiagas tiesiog tepkite ant šulinėlių. Tam vienoje iš šulinėlių turi būti įdėtas molekulinio svorio žymeklis, teigiama kontrolė, tai yra žinoma medžiaga, kas tai yra, neigiama kontrolė, užtikrinanti reakcijos pagrįstumą, ir analizuojami mėginiai. Visi mėginiai turi būti sumaišyti su fluorescenciniu dažikliu, nes tokiu būdu galima vizualizuoti juostas ant transilluminator.

Gelis su mėginiais turi būti dedamas į elektroforezės indą, kuriame yra specifinis buferinis tirpalas, o tada prietaisas įjungiamas taip, kad būtų elektros srovė ir, atitinkamai, potencialo skirtumas, o tai svarbu atskyrimui. dalelės pagal jų apkrovą ir dydį. Elektroforezės trukmė skiriasi priklausomai nuo procedūros tikslo ir gali trukti iki 1 valandos.

Pasibaigus nustatytam laikui, galima pamatyti elektroforezės išbėrimo pro transilluminatorių rezultatą. Kai želė dedama ultravioletinėje arba LED šviesoje, galima vizualizuoti juostos modelį: kuo didesnė molekulė, tuo mažesnė jos migracija, artėjant prie šulinio, o kuo šviesesnė molekulė, tuo didesnis migracijos potencialas..

Kad reakcija būtų patvirtinta, turi būti vizualizuotos teigiamos kontrolės juostos, o neigiamos kontrolės metu nieko neturi būti vizualizuota, kitaip tai yra požymis, kad buvo užteršimas, ir visas procesas turi būti pakartotas..

Elektroforezės tipai

Elektroforezė gali būti atliekama skirtingais tikslais ir, atsižvelgiant į jos paskirtį, gali būti naudojami keli gelio tipai, dažniausiai naudojami poliakrilamidas ir agarozė..

Elektroforezė mikroorganizmams nustatyti dažniausiai atliekama tyrimų laboratorijose, tačiau diagnostikos tikslais elektroforezė gali būti naudojama nustatant hematologines ligas ir ligas, kurios išsivysto padidėjus baltymų kiekiui, ir yra pagrindinės elektroforezės rūšys. :

1. Hemoglobino elektroforezė

Hemoglobino elektroforezė yra laboratorinė technika, atliekama siekiant nustatyti įvairius hemoglobino tipus, cirkuliuojančius kraujyje, leidžiančius nustatyti ligų, susijusių su hemoglobino sinteze, buvimą. Hemoglobino tipas nustatomas atliekant elektroforezę esant konkrečiam pH, idealiu atveju - nuo 8,0 iki 9,0, tikrinant juostų modelį, kurį galima palyginti su įprastu modeliu, leidžiant nustatyti nenormalių hemoglobinų buvimą..

Kam jis skirtas: Hemoglobino elektroforezė atliekama norint ištirti ir diagnozuoti ligas, susijusias su hemoglobino sinteze, tokias kaip pjautuvo pavidalo ląstelių anemija ir hemoglobino C liga, be to, kad jos yra naudingos diferencijuojant talasemiją. Sužinokite, kaip interpretuoti hemoglobino elektroforezę.

2. Baltymų elektroforezė

Baltymų elektroforezė yra egzaminas, kurio reikalauja gydytojas, kad būtų galima įvertinti kraujyje cirkuliuojančių baltymų kiekį ir tokiu būdu nustatyti ligas. Šis tyrimas atliekamas iš kraujo mėginio, kuris centrifuguojamas, norint gauti plazmą - tą kraujo dalį, kurią, be kitų medžiagų, sudaro baltymai.

Po elektroforezės gali būti vizualizuotas juostų modelis ir grafikas, kuriame nurodomas kiekvienos baltymų frakcijos kiekis, kuris yra pagrindinis diagnozės nustatymo pagrindas.

Kam jis skirtas: Baltymų elektroforezė leidžia gydytojui ištirti išsėtinės mielomos, dehidratacijos, cirozės, uždegimo, kepenų ligos, pankreatito, vilkligės ir hipertenzijos pasireiškimus pagal juostos schemą ir tyrimo ataskaitoje pateiktą diagramą..

Supraskite, kaip tai daroma ir kaip suprasti baltymo elektroforezės rezultatą.