Molekulinė diagnozė, kas tai yra, kam jis skirtas ir kaip tai daroma
Molekulinė diagnozė atitinka molekulinių metodų rinkinį, kurio tikslas yra nustatyti DNR pokyčius, kurie, pavyzdžiui, gali rodyti genetines ligas ar vėžį. Be to, molekuliniai metodai yra plačiai naudojami infekcinėms ligoms nustatyti ir patvirtinti, nes jie reiškia greitesnį ir tikslesnį diagnostikos metodą..
Molekulinė diagnozė yra brangi, todėl gydytojai to nereikalauja labai dažnai, tačiau ji pateikia tikslius rezultatus, susijusius su pokyčio buvimu, būdu, kuris gali sutrikdyti organizmo funkcionavimą ir paciento reakcija į gydymas.
Kam jis skirtas?
Molekulinę diagnozę galima atlikti keliais tikslais, iš kurių pagrindiniai yra:
- Mutacijų, susijusių su leukemija, tokias kaip BCR-ABL translokacijos, būdingos lėtinei mieloleukemijai (LML), nustatymas;
- Būdinga mutacija hematologinės ligos, tokios kaip paveldima hemochromatozė, policitemija vera, esminė trombocitemija ir trombofilija, pvz..
- Molekuliniai pokyčiai, rodantys vėžys, pavyzdžiui, gaubtinės ir tiesiosios žarnos, plaučių, krūties ir smegenų vėžys;
- Diagnozė infekcinės ligos, tokių kaip hepatitas, uretritas, toksoplazmozė, leišmaniozė ir kt., be to ŽPV virusas.
Molekulinė diagnozė, nepaisant to, kad yra laikoma brangia, palyginti su kitomis diagnostikos metodikomis, yra tikslesnė, nes sugeba informuoti apie pokyčius, susijusius su tam tikra liga, ir apie šio pokyčio įtakos laipsnį organizme, tokiu būdu padedant asmeniui gydyti..
Molekuliniai metodai yra ne tik naudojami diagnozuoti keletą ligų, bet ir vertinti atsaką į gydymą, ypač vėžiu sergantiems žmonėms. Tai yra vienas efektyviausių metodų, rodančių ligos progresavimą ir atkrytį..
Kaip tai daroma
Molekulinę diagnozę gali atlikti bet kuris mėginys, paprašytas gydytojo, kuris geriausiai gali suteikti informacijos apie paciento būklę, tai gali būti šlapimas, seilės ar daugeliu atvejų kraujas. Pasninkas ar kitas pasirengimas egzaminui nėra būtinas.
Mėginys surenkamas ir išsiunčiamas į laboratoriją kartu su gydytojo rekomendacijomis, informuojančiomis apie egzaminą ar tyrimų tipą, kuris turėtų būti atliktas. Atlikta molekulinė technika priklauso nuo reikalaujamo egzamino ir apima tikslių procedūrų, kuriomis siekiama nustatyti, ar nėra ar nėra gydytojo reikalaujamų pokyčių, seriją.
Paprastai naudojamas tik nedidelis išsiųsto pavyzdžio kiekis, o likusieji kaupiami taip, kad prireikus egzaminas būtų pakartotas.
Pažiūrėkite, kokie yra pagrindiniai molekuliniai metodai
PGR
A PGR, trumpai apibūdinti polimerazės grandininę reakciją arba Polimerazės grandininė reakcija, yra molekulinė technika, kurią sudaro genetinės medžiagos fragmento, ty DNR ar RNR, amplifikacija, siekiant nustatyti mutacijas ir tokiu būdu padėti diagnozuoti ligas.
Šis metodas pagamintas ekstrahuojant ir išgryninant genetinę medžiagą, kuri dedama į mišinį, kuriame vienas iš komponentų yra restrikcijos fermentas, kuris kinta priklausomai nuo reikalaujamo tyrimo ir kurio paskirtis yra supjaustyti medžiagą į fragmentus. kad būtų galima nustatyti galimą genetinį pakitimą. Mišinys dedamas į termociklerį, kuris yra prietaisas, veikiantis temperatūros svyravimus, kuriuos nurodo specialistas pagal egzaminą, ir tokiu būdu leidžiantis sustiprinti genetinį fragmentą. Įprasto PGR atveju po amplifikacijos PGR produktas yra tiriamas elektroforezė, tai yra molekulinė technika, pagrįsta fragmentų svoriu ir dydžiu, tai yra, atsižvelgiant į šias charakteristikas, susidaro juostos schema, kurios analizė atliekama remiantis teigiamos kontrolės juosta, tai yra juosta, kuri yra žinoma tai atitinka genetinį pakitimą.
A Realaus laiko PGR, dar vadinamas qPCR, tai yra kiekybinio PGR rūšis, tai yra, be genetinio pakitimo nustatymo, jis taip pat gali suteikti informacijos apie genų ekspresiją, tai yra, kiek pakitęs genas yra ekspresuojamas organizme, taigi gali būti naudojami diagnozei palengvinti ir gydymui stebėti. Realaus laiko PGR nereikia elektroforezės, visą genetinės medžiagos amplifikavimo ir analizės procesą atlieka prietaisas, o rezultatą aiškina apmokytas sveikatos priežiūros specialistas.
Sekavimas
sekos yra molekulinė technika, susidedanti iš DNR nukleotidų, kurie yra genetinės medžiagos vienetai, sekos nustatymo. Sekavimas vyksta iš reakcijos, panašios į PGR, tačiau į amplifikacijos mišinį modifikuoti nukleotidai pridedami pridedant fluoro chromus, kurie, medžiagai amplifikuojant, modifikuoti nukleotidai yra įtraukiami į DNR ir sukuria kelis fragmentus, kurie atitinka sekos produktą.
Reakcijos produktas dedamas į įtaisą, vadinamą DNR sekavimo įtaisu, kuriame, fragmentams pasiekiant įrangos lazerį, sužadinami fluorochromai, skleidžiant fluorescenciją, kurią įranga rodo smailėmis, o kiekviena smailė atitinka į nukleotidą. Pasibaigus reakcijai, įranga informuos DNR seką ir tokiu būdu galės padėti gydytojui diagnozuoti genetines ligas..
